Nukleinsäure-Reinigung aus Gelen und Reaktionsansätzen

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GELase™

GELase enthält ein einzigartiges, Beta-Agarose verdauendes Enzym, das von Epicentre für einfache, quantitative Isolierungen von intakter DNA und RNA aus Low melting point (LMP) Agarosegelen entwickelt wurde.

Das Gel kann direkt in TAE, TBE, MOPS oder Phosphat-Elektrophoresepuffer mit GELase behandelt werden. Um eine höhere Effektivität zu erzielen, kann GELase Puffer zugegeben werden oder die Elektrophoresepuffer werden gegen GELase Puffer ausgetauscht. Die GELase spaltet das Kohlenhydratgerüst des aufgeschmolzenen LMP-Agarosegels in lösliche Oligosaccharide. Die gewünschte DNA bzw. RNA wird anschließend einfach und quantitativ aus der klaren Lösung isoliert.

Typische Anwendungen

Restriktionsmapping
Klonierung
Labeling
DNA-Sequenzierung
Transformation von YAC-, BAC-, Cosmid-, Fosmid- und Plasmidvektoren
Amplifikation

Unit Definition

Eine Unit GELase verdaut 600 mg (600 µl) aufgeschmolzenes 1%iges LMP-Agarosegel in GELase Puffer in einer Stunde bei 45°C.

Benötigte Zeit zur Verdauung von 200 mg 1%igen LMP-Agarosegels in TAE-Puffer

Units GELase

Zeit

3,0

8 Minuten

2,0

15 Minuten

1,0

30 Minuten

0,33

60 Minuten

Bestellinformationen:

Art.-Nr.

[Epicentre Cat.-No.]

Bezeichnung

Verpackung

160001

[G191ML]

Gelase 50 x Reaktionspuffer

1 ml

160005

[G195ML]

Gelase 50 x Reaktionspuffer

5 ml

160006

[G1005ML]

Ammoniumacetat-Lösung, 5 M

5 ml

160007

[G1025ML]

Ammoniumacetat-Lösung, 5 M

25 ml

160050

[G09050]

Gelase, Enzym + 50 x Puffer, 1 U/µl

50 Units

160051

[G31050]

Gelase, Enzym + 50 x Puffer, 0.2 U/µl

50 Units

160100

[G09100]

Gelase, Enzym + 50 x Puffer, 1 U/µl

100 Units

160200

[G09200]

Gelase, Enzym + 50 x Puffer, 1 U/µl

200 Units

160201

[G31200]

Gelase, Enzym + 50 x Puffer, 0.2 U/µl

200 Units

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EasyPure DNA Purification Kit

Zur einfachen und zuverlässigen Reinigung von DNA aus Agarosegelen oder Reaktionsansätzen

Pluspunkte:

Dauer der Isolierung: Nur 15 bis 20 Minuten.
Typische Ausbeuten: 60 bis 80 %.
Sowohl für die Reinigung aus Agarosegelen als auch aus Lösungen geeignet.
Auch für die Aufreinigung von Plasmid DNA aus Bakterienlysaten einsetzbar.
Einsatz der isolierten DNA für enzymatische Verfahren und Injektionen in Oocyten möglich.

Arbeitsweise:

Das EasyPure Kit arbeitet mit einer größendefinierten Silicamatrix, die sowohl einzel- als auch doppelsträngige DNA bindet, während DNA Fragmente unter 40 bp (z. B. Primer) nicht gebunden werden.

Bestellinformationen:

DNA Purifikation Kit

Art.-Nr.

Bezeichnung

Verpackung

390001

EasyPure

1 Kit

Einzelkomponenten

Art.-Nr.

Bezeichnung

Verpackung

390005

SALT

125 ml

390006

BIND

1,8 ml

390007

WASH-Konzentrat

12,5 ml

390008

MELT

15 ml

DNA Reinigung

Die Aufreinigung der gewünschten DNA erfolgt in drei Schritten über eine Bindung, Waschung und Elution. Die Silicamatrix erleichtert das Resuspendieren pelletierter DNA und verringert somit Scherwirkungen. Da die abschließende Elution der DNA in einem Volumen von 10-20 μl erfolgt, entfällt eine weitere Konzentrierung z. B. durch Ethanolfällung.

Kapazität (ca.):

300 Aufreinigungen aus Lösungen (100 μl Ansätze à 1 μg DNA) oder
400 Aufreinigungen aus TAE-Agarosegelen (je 100 μl Gel) oder
270 Aufreinigungen aus TBE-Agarosegelen (je 100 μl Gel)

Inhalt des Kits:

SALT, Salzlösung: 125 ml
MELT, Schmelzlösung: 15 ml
BIND, Bindelösung: 1,8 ml
WASH-Konzentrat: 12,5 ml

Haltbarkeit

Die Mindesthaltbarkeit der ungeöffneten Kitkomponenten beträgt bei Raumtemperatur 1 Jahr. Geöffnete Kitkomponenten sollten im Kühlschrank gelagert werden. MELT-Lösung hat die größte Stabilität bei Raumtemperatur.