Das Verfahren   
   Die TargetAmp Kits   

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RNA-Amplifikationskits von Epicentre
TargetAmp™ RNA Amplifikationskits
  • RNA Amplifikation ab einer Zelle !!
  • Amplifikation um den Faktor > 5000 (1-Round Kit)
  • Amplifikation um den Faktor > 5 Millionen (2-Round Kit)
 
Epicentre bietet jetzt 4 verschiedene RNA Amplifikationskits zur Produktion von Antisense RNA (aRNA oder cRNA) an. Nach einer Markierung kann diese hochqualitative aRNA auf nahezu allen gängigen DNA Microarray Plattformen eingesetzt werden, wie z.B. Affymetrix GeneChip®, ABI, Agilent, GE CodeLink™ und anderen kommerziellen Chips oder selbst-hergestellten Arrays. Die mit den TargetAmp Kits erzeugte aRNA eignet sich auch sehr gut für Genexpressions-Analysen mittels quantitativer RT-PCR.
 
Ein weiterer Vorteil der TargetAmp Kits besteht in der Möglichkeit einer indirekten Markierung der RNA mit Aminoallyl-UTP. Die damit erzeugte Aminoallyl-aRNA (AA-aRNA) kann schnell und effektiv mit Biotin oder anderen Fluoreszenzfarbstoffen, wie z.B. Cy® oder Alexa® markiert werden. Der Hauptvorteil dieser indirekten Markierung im Vergleich zu einer direkten Markierung mit z.B. Biotin-UTP besteht in der
  • höheren Ausbeute an aRNA
  • größeren Effizienz des Einbaus der Farbstoffe
  • geringerer Hintergrund
  • signifikante Kostenreduktion (30% - 50% pro Reaktion)
Die TargetAmp RNA Amplifikationskits arbeiten nach einem verbesserten und vereinfachten Eberwine RNA Amplifikations-Protokoll.
  • TargetAmp 1-Round Amplifikation in ca. 6 Stunden
  • TargetAmp 2-Round Amplifikation in ca. 2 Tagen
  • 1st-Strand und 2nd-Strand cDNA Synthese erfolgt bei erhöhter Temperatur, um die höchstmögliche Ausbeute an full-length cDNA zu garantieren
  • Eine Aufreinigung der cDNA vor der in vitro Transkription ist nicht notwendig
  • TargetAmp Kits benutzen die bewährte AmpliScribe in vitro Transkriptions-Technologie für eine höchste Ausbeute an aRNA oder Aminoallyl-aRNA
  • TargetAmp Kits sind optimiert für den Einsatz mit SuperScript II und SuperScript III Reverse Transcriptase (nicht im Kit enthalten)

 
1-Round Amplification
2-Round Amplification
TargetAmp™ 1-Round Aminoallyl-aRNA Amplification Kit 101
TargetAmp™ 1-Round aRNA Amplification Kit 103
TargetAmp™ 1-Round Biotin-aRNA Amplification Kit 104
TargetAmp™ 2-Round Aminoallyl-aRNA Amplification Kit 1.0
TargetAmp™ 2-Round aRNA Amplification Kit 2.0
Ausgangsmenge Gesamt RNA
25 ng – 500 ng
25 ng – 500 ng
25 ng – 500 ng
10 pg – 500 pg
10 pg – 500 pg
Typische Ausbeute amplifizierter aRNA
3 µg – 60 µg
3 µg – 60 µg
3 µg – 60 µg
1,5 µg – 70 µg
1,5 µg – 70 µg
Reverse Transkriptase
SuperScript™ III (nicht im Kit enthalten)
SuperScript™ III
(nicht im Kit enthalten)
SuperScript™ III
(nicht im Kit enthalten)
SuperScript™ III & SuperScript™ II
(nicht im Kit enthalten)
SuperScript™ III & SuperScript™ II
(nicht im Kit enthalten)
Amplifikationsfaktor
> 5.000
> 5.000
> 5.000
> 5.000.000
> 5.000.000
Zeitbedarf
6 Stunden
6 Stunden
6 Stunden
2 Tage
2 Tage
Endprodukt
Aminoallyl-aRNA
unmarkierte aRNA
Biotin-aRNA
Aminoallyl-aRNA
unmarkierte aRNA

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