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Die TargetAmp Kits
Das Verfahren
Die TargetAmp Kits
Die TargetAmp Kits
TargetAmp™ 1-Round Aminoallyl-aRNA Amplification Kit 101
Synthese Aminoallyl-markierter Antisense RNA aus mRNA oder Gesamt-RNA ab ca. 2500 Zellen
Amplifikation um den Faktor > 5000
Optimiert für SuperScript III Reverse Transcriptase (nicht im Kit enthalten)
Das neue TargetAmp 1-Round Aminoallyl-aRNA Amplification Kit 101 amplifiziert den mRNA [poly(A)RNA] – Anteil einer Gesamt-RNA um das mindestens 5000-fache. Das Kit produziert hohe Ausbeuten an Antisense Aminoallyl-RNA, die mit Biotin oder Fluoreszenzfarbstoffen wie z.B. Cy
®
oder Alexa
®
markiert werden können. Damit ist es ideal geeignet für oligo oder cDNA Microarrays (z.B. GeneChip
®
, CodeLink
®
).
eingesetzte Gesamt-RNA (ng)
geschätzter Anteil mRNA in der Ausgangs RNA (ng) [ca. 2% mRNA]
Ausbeute AA-aRNA (µg)
Amplifikationsfaktor
10
0,2
1,3
6500
25
0,5
2,9
5800
50
1
5,2
5200
100
2
11,4
5700
200
4
22,6
5650
500
10
69,9
6990
Tab.: aRNA Ausbeute und Amplifikationsfaktor bei Einsatz unterschiedlicher Mengen an HeLa-Zellen-Gesamt RNA. Die Werte sind durchschnittliche Ergebnisse, erzielt mit der HeLa Kontroll RNA aus dem Kit.
Inhalt des Kits
TargetAmp T7-Oligo(dT) Primer A
TargetAmp Reverse Transcription PreMix-SS
TargetAmp DNA Polymerase PreMix-SS 1
TargetAmp DNA Polymerase-SS 1
TargetAmp
in vitro
Transcription PreMix B
TargetAmp T7 RNA Polymerase
TargetAmp T7 Transcription Puffer
Aminoallyl-UTP
DNaseI (RNase-frei)
DTT (Dithiothreitol)
HeLa Gesamt RNA (Kontrolle)
Wasser (RNase-frei)
Bestellinformationen
Art.-Nr.
[Epicentre Cat.-No.]
Verpackung
150700
TAA1R4910
10 Reaktionen
150703
TAA1R4924
24 Reaktionen
TargetAmp™ 1-Round aRNA Amplification Kit 103
Synthese unmarkierter oder benutzerspezifisch-markierter Antisense RNA aus mRNA oder Gesamt-RNA ab ca. 2500 Zellen
Amplifikation um den Faktor > 5000
Optimiert für SuperScript III Reverse Transcriptase (nicht im Kit enthalten)
eingesetzte Gesamt-RNA (ng)
geschätzter Anteil mRNA in der Ausgangs RNA (ng) [ca. 2% mRNA]
Ausbeute AA-aRNA (µg]
Amplifikationsfaktor
10
0,2
1,6
8000
25
0,5
3,3
6600
50
1
6,0
6000
100
2
10,8
5600
200
4
21
5250
500
10
59
5900
Tab.: aRNA Ausbeute und Amplifikationsfaktor bei Einsatz unterschiedlicher Mengen an HeLa-Zellen-Gesamt RNA. Die Werte sind durchschnittliche Ergebnisse, erzielt mit der HeLa Kontroll RNA aus dem Kit.
Inhalt des Kits
TargetAmp T7-Oligo(dT) Primer A
TargetAmp Reverse Transcription PreMix-SS
TargetAmp DNA Polymerase PreMix-SS 1
TargetAmp DNA Polymerase-SS 1
TargetAmp T7 RNA Polymerase
TargetAmp T7 Transcription Puffer
NTPs
DNase (RNase-frei)
DTT (Dithiothreitol)
HeLa Gesamt RNA (Kontrolle)
Wasser (RNase-frei)
Bestellinformationen
Art.-Nr.
[Epicentre Cat.-No.]
Verpackung
150707
TAU1R5110
10 Reaktionen
150708
TAU1R5124
24 Reaktionen
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TargetAmp™ 1-Round Biotin-aRNA Amplification Kit 104
Synthese Biotin-markierter Antisense RNA aus mRNA oder Gesamt-RNA ab ca. 2500 Zellen
Amplifikation um den Faktor > 5000
Optimiert für SuperScript III Reverse Transcriptase (nicht im Kit enthalten)
Inhalt des Kits:
TargetAmp T7-Oligo(dT) Primer A
TargetAmp Reverse Transcription PreMix-SS
TargetAmp DNA Polymerase PreMix-SS 1
TargetAmp DNA Polymerase-SS 1
TargetAmp T7 RNA Polymerase
TargetAmp T7 Transcription Puffer
ATP, CTP, GTP
UPT / Biotin-UTP
DNase (RNase-frei)
DTT (Dithiothreitol)
HeLa Gesamt RNA (Kontrolle)
Wasser (RNase-frei)
Bestellinformationen:
Art.-Nr.
[Epicentre Cat.-No.]
Verpackung
150682
[TAB1R6910]
10 Reaktionen
150684
[TAB1R6924]
24 Reaktionen
TargetAmp™ 2-Round Aminoallyl-aRNA Amplification Kit 1.0
Synthese Aminoallyl-markierter Antisense RNA aus mRNA oder Gesamt-RNA ab 1 Zelle
Amplifikation um den Faktor > 5 Millionen
Optimiert für SuperScript III & SuperScript II Reverse Transcriptase (nicht im Kit enthalten)
Das TargetAmp™ 2-Round Aminoallyl-aRNA Amplification Kit 1.0 ist geeignet, um poly(A)-RNA aus nur einer einzigen Zelle zu amplifizieren. Die RNA (aus z.B. Laser-captured Zellen, Biopsieproben, Zellkulturen oder anderen Proben mit wenig Ausgangsmaterial) wird dabei mindestens um das 5 Millionenfache vervielfältigt. Die lineare Amplifikation der RNA erfolgt über einen verbesserten Eberwine Prozess und führt zu einer Aminoallyl-gelabelten Antisense RNA (AA-aRNA). Diese auch als cRNA bezeichnete RNA kann über eine Kopplungsreaktion mit z.B. Biotin, Cy
®
, Alexa
®
oder einen anderen Farbstoff markiert werden und ist anschließend ein geeignetes Target für Hybridisierungen von GeneChip
®
, CodeLink
®
‚ oder anderen Microarray Chips.
eingesetzte Gesamt-RNA aus Rattengehirn (pg)
geschätzter Anteil mRNA in der Ausgangs RNA (pg) [ca. 5% mRNA]
Ausbeute AA-aRNA (µg]
Amplifikationsfaktor
0
0
0,6
N/A
10
0,5
3
6 Millionen
50
2,5
19
7,6 Millionen
100
5
53
10,6 Millionen
200
10
103
10,2 Millionen
500
25
161
60,4 Millionen
Tab.: aRNA Ausbeute und Amplifikationsfaktor bei Einsatz unterschiedlicher Mengen an Gesamt RNA aus Rattengehirn.
Inhalt des Kits
TargetAmp T7-Oligo(dT) Primer B
TargetAmp Reverse Transcription PreMix-SS
TargetAmp DNA Polymerase PreMix-SS 1
TargetAmp DNA Polymerase-SS 1
TargetAmp cDNA Finishing Solution-SS
TargetAmp Random Primer-SS
TargetAmp RNase H-SS
TargetAmp T7-Oligo(dT) Primer C
TargetAmp DNA Polymerase PreMix-SS 2
TargetAmp DNA Polymerase-SS 2
TargetAmp In Vitro Transcription PreMix A
TargetAmp In Vitro Transcription PreMix B
TargetAmp T7 RNA Polymerase
TargetAmp T7 Transcription Puffer
Aminoallyl-UTP
DNaseI (RNase-frei)
DTT (Dithiothreitol)
HeLa Gesamt RNA (Kontrolle)
Poly(I)
Wasser (RNase-frei)
Bestellinformationen
Art.-Nr.
[Epicentre Cat.-No.]
Verpackung
150710
TAA2R4910
10 Reaktionen
150713
TAA2R4924
24 Reaktionen
TargetAmp™ 2-Round aRNA Amplification Kit 2.0
Synthese unmarkierter oder benutzerspezifisch-markierter Antisense RNA aus mRNA oder Gesamt-RNA ab 1 Zelle
Amplifikation um den Faktor > 5 Millionen
Optimiert für SuperScript III & SuperScript II Reverse Transcriptase (nicht im Kit enthalten)
Inhalt des Kits
TargetAmp T7-Oligo(dT) Primer B
TargetAmp Reverse Transcription PreMix-SS
TargetAmp DNA Polymerase PreMix-SS 1
TargetAmp DNA Polymerase-SS 1
TargetAmp cDNA Finishing Solution-SS
TargetAmp Random Primers-SS
TargetAmp RNase H-SS
TargetAmp T7-Oligo(dT) Primer C
TargetAmp DNA Polymerase PreMix-SS 2
TargetAmp DNA Polymerase-SS 2
TargetAmp
In Vitro
Transcription PreMix A
TargetAmp T7 RNA Polymerase
TargetAmp T7 Transcription Puffer
NTPs
DNase (RNase-frei)
DTT (Dithiothreitol)
HeLa Gesamt RNA (Kontrolle)
Wasser (RNase-frei)
Poly(I)
Bestellinformationen
Art.-Nr.
[Epicentre Cat.-No.]
Verpackung
150715
TAU2R5110
10 Reaktionen
150718
TAU2R5124
24 Reaktionen
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