• Optimal zur Erzeugung von Full-Length cDNA (first strand) aus Gesamt-RNA oder polyadenylierter RNA
• Enthält sowohl Oligo-(dT) als auch Random Primer (wahlweise einsetzbar)
• Einsatz der neuen thermostabilen (bis 65 °C) MonsterScript Reverse Transcriptase (ohne RNase H Aktivität) ermöglicht die Synthese einer cDNA von mehr als 15 kb
• Nur pg Gesamt-RNA werden als Ausgangsmaterial benötigt
• Der Einsatz von Betain* während der reversen Transkription reduziert einen vorzeitigen Abbruch der Reaktion

MonsterScript™ Reverse Transcriptase was used to reverse transcribe six dilutions (8 x 106 to 8 x 101 pg) of an RNA transcript into cDNA in 20-µl reactions. Ten microliters of each reverse transcription reaction was then used in 50-µl real-time PCR reactions, in duplicate, using EPICENTRE's TAQurate™ GREEN Real-Time PCR MasterMix. A PCR efficiency of 99.4% and correlation coefficient of 1.000 was achieved

• First-Strand cDNA Synthese
• Erzeugung von cDNA für anschließende PCR oder Real-Time PCR
• RT-PCR Validierung von Gen Expressionsdaten aus Microarray Experimenten
• RT-PCR Validierung und Quantifizierung von Gene Silencing durch RNA Interference Experimenten

• MonsterScript Reverse Transcriptase (mit RNase Inhibitor)
• MonsterScript PreMix Lösung (mit Mg²⁺, dNTPs und Betain)
• Oligo (dT) Primer
• Random Nonamer Primer
• Steriles Wasser (RNase-frei)

• Diese thermostabile reverse Transkriptase (volle Aktivität bis 65°C) ist ideal auch für reverse Transkription GC reicher Regionen sowie schwieriger Sekundärstrukturen
• Das vollständige Fehlen von RNase H Aktivität (RNase H-Minus) ermöglicht die Synthese einer cDNA von mehr als 15 kb
• Nur pg Gesamt-RNA werden als Ausgangsmaterial benötigt

1A

MonsterScript Reverse Transcriptase produziert Fulllength cDNA von mRNA bis 15 kb oder größer:

1B

Die ca 15,2 kb m RNA des humanen Guanin Nukleotid Exchange Faktors (p532) HGNEFp532 aus zellulärer HeLa Gesamt- RNA wurde revers transkribiert. Als Primer wurde ein oligo(dT)-Primer eingesetzt. 2µl dieser Reverse Transcriptase Reaktion wurden anschließend benutzt, um eine 1,3 kb-Region vom 5'-Ende der HGNEFp532 mRNA (68 Basen vom 5'-Ende entfernt) zu amplifizieren (mit dem FailSafe PCR System). 1A. Nachweis des 1,3 kb PCR Fragments demonstriert die Fulllength revers Transcription der HGNEFp532 mRNA. 1B. Agarosegel Analyse der PCR Reaktion des 1,3 kb Fragments von HGNEFp532

• First-Strand cDNA Synthese für
• cDNA Klonierung und cDNA Library Construction
• RT-PCR und Real Time RT-PCR
• Genexpressionsanalyse
• Herstellung gelabelter cDNA Sonden

Art.-Nr.	[Epicentre Cat.-No.]	Bezeichnung	Verpackung
150730	[MSTA5110]	MonsterScript Reverse Transkriptase + Puffer	10 Reaktionen
150732	[MSTA5124]	MonsterScript Reverse Transkriptase + Puffer	24 Reaktionen

50 Units/µl, einschließlich 5X Reaktionspuffer

• MessageBOOSTER T7-Oligo(dT) Primer A
• RNase Inhibitor
• MessageBOOSTER Reverse Transscription PreMix
• MessageBOOSTER DNA Polymerase PreMix 1
• MessageBOOSTER DNA Polymerase 1
• MessageBOOSTER cDNA Finishing Solution
• MessageBOOSTER Random Primer
• MessageBOOSTER RNase H
• MMLV Reverse Transcriptase
• MessageBOOSTER In Vitro Transcription  PreMix A
• MessageBOOSTER T7 RNA Polymerase
• MessageBOOSTER T7 Transcription Puffer
• Forward and Reverse Control PCR Primer
• Dithiothreitol (DTT)
• Wasser, RNase-frei
• Poly(I)
• NRK Total RNA Control

Biozym Art.-Nr.	[Epicentre Cat.-No.]	Bezeichnung	Verpackung
150750	MB060110	MessageBOOSTER cDNA Synthesis Kit für qPCR	10 Reaktionen
150752	MB060124	MessageBOOSTER cDNA Synthesis Kit für qPCR	24 Reaktionen

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• Erzeugung von Templates für RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends)
• 5' und 3' End Mapping von RNA
• Ligation von Oligoribonukleotiden an TAP-behandelte zelluläre RNA für die Konstruktion von Full-length cDNA Bibliotheken
• Mapping der Transkriptionsinitiierungssites von eukaryontischen und prokaryontischen Transkripten
• Radiolabeling von RNA für Sequenzierungen oder Hybridisierungen

Abb.: Schema des Epicentre Funktions-Tests für die TAP

Art.-Nr.	[Epicentre Cat.-No]	Bezeichnung	Verpackung
187050	T19050	Tobacco Acid Pyrophosphatase (TAP)	50 Units
187100	T19100	Tobacco Acid Pyrophosphatase (TAP)	100 Units
187250	T199250	Tobacco Acid Pyrophosphatase (TAP)	250 Units
187500	T19500	Tobacco Acid Pyrophosphatase (TAP)	500 Units

einschließlich 10X Reaktionspuffer

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