Genomic Library Production

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Rekombinanten-Screening

Kompetente Zellen

Phosphatasen & Ligasen

Ligationskits

Genomic Library Production

CopyControl™ Cloning System

Das CopyControl Cloning System ermöglicht die vollständige Kontrolle über den gesamten Klonierungsprozess.

Sichern Sie die Stabilität der Klone durch single copy Klonierung.
Für nachfolgende Applikationen wie z. B. Sequenzierung, Fingerprinting oder in vitro Transkription erhalten Sie durch Induktion problemlos größere DNA Mengen (high copy).

Das CopyControl System besteht aus den zwei folgenden Komponenten:

1. CopyControl pCC1 Vektor

Der Vektor enthält zwei verschiedene origin of replication, einen single copy und einen induzierbaren multiple copy origin of replication (oriV). Als Selektionsmarker dient das Chloramphenicol Resistenzgen. Zur Initiierung der Replikation ausgehend vom oriV ist das trfA Genprodukt erforderlich (exprimiert in TransforMax elektrokompetenten oder chemisch kompetenten Zellen). Die pCC1 Vektoren in den CopyControl Klonierungskits sind linearisiert (entweder BamH I, Hind III, EcoR I oder Eco72 I), dephosphoryliert und hoch gereinigt.

2. TransforMax™ EPI300™ elektrokompetente oder chemisch kompetente E. coli Zellen

Die kompetenten Zellen exprimieren das trans aktive trfA Genprodukt, das für die Replikation ausgehend von oriV erforderlich ist. Das trfA Gen steht unter regulatorischer Kontrolle eines induzierbaren Promotors. Die Induktion zur hohen Kopienzahl erfolgt durch die Induktionslösung. Die kompetenten E. coli sind auch als Zellen mit einer Resistenz gegen die Phagen T1 u. T5 (TransforMax EPI300-T1R) erhältlich.

Das Prinzip des CopyControl Systems

CopyControl BAC, Fosmid oder PCR Klone liegen zunächst als single copy Klone in den TransforMax EPI300 E. coli vor.
Induktion zur hohen Kopienzahl erfolgt durch Zugabe der Induktionslösung.
Anzahl der Kopien nach der Induktion für BACs 10-20, Fosmide und PCR Klone 10-50 pro Zelle.

CopyControl™ BAC Cloning Kits

Zur schnellen Herstellung von BAC Bibliotheken. Die Kits enthalten alle erforderlichen Reagenzien in ausreichender Menge für eine 10fach humane BAC Bibliothek. Die genomische DNA kann beliebigen Ursprungs sein.

Inhalt des Kits:

CopyControl pCC1 BACTM (BamH I) oder CopyControl pCC1 BAC (Hind III) oder CopyControl pCC1 BAC (EcoR I) Cloning-Ready Vektor
Fast-Link™ DNA Ligase
Fast-Link™ 10X Ligationspuffer
ATP
BAC-Tracker™ Supercoiled DNA Leiter
EpiBlue™ Lösung
EpiLyse™ Lösung
Kontroll DNA Insert (50 kb)
Kontroll BAC Klon (145 kb)

Bestellinformationen:

Art.-Nr.

[Epicentre Cat.-No.]

Bezeichnung

Verpackung

191200

[CCBAC1B]

CopyControl BAC Cloning Kit (BamH I)

1 Kit

191205

[CCBAC1H]

CopyControl BAC Cloning Kit (Hind III)

1 Kit

191210

[CCBAC1E]

CopyControl BAC Cloning Kit (EcoR I)

1 Kit

Individuelle Kitkomponenten:

Art.-Nr.

[Epicentre Cat.-No.]

Bezeichnung

Verpackung

191500

[CCIS125]

CopyControl Induction Solution

25 ml

190300

[BFP0701]

pCC1BAC/pIndigoBAC-5 Forward End-Sequencing Primer

1 nmol

190305

[BRP0801]

pCC1BAC/pIndigoBAC-5 Reverse End-Sequencing Primer

1 nmol

191201

[CBAC311B]

CopyControl pCC1BAC (BamH I Cloning-Ready) Vector

375 ng

191206

[CBAC311H]

CopyControl pCC1BAC (Hind III Cloning-Ready) Vector

375 ng

191211

[CBAC311E]

CopyControl pCC1BAC (EcoR I Cloning-Ready) Vector

375 ng

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CopyControl™ Fosmid Library Production Kit

Zur effizienten Konstruktion von bis zu 10 Fosmid Bibliotheken (Insertgröße ca. 40 kb)

Prinzip der Erzeugung einer Fosmid-Genbank mittels CopyControl Fosmid Library Production Kits.

Inhalt des Kits

CopyControl pCC1FOSTM Cloning-Ready Vektor (Eco72 I site, blunt end)
End-Repair Enzym Mix
End-Repair 10X Puffer
dNTP Mix
Fast-Link DNA Ligase
Fast-Link 10X Ligationspuffer
ATP Lösung
GELase
GELase 50X Reaktionspuffer
MaxPlax Lambda Packaging Extracts
Kontroll-DNA
Ligierte Lambda Kontroll-DNA
EPI300 Plating Strain
Kontroll Lambda Plating Strain
CopyControl Induction Solution

Bestellinformationen:

Art.-Nr.

[Epicentre Cat.-No.]

Bezeichnung

Verpackung

191070

[CCFOS110]

CopyControl Fosmid Library Production Kit

1 Kit

Individuelle Kitkomponenten:

Art.-Nr.

[Epicentre Cat.-No.]

Bezeichnung

Verpackung

191500

[CCIS125]

CopyControl Induction Solution

25 ml

190072

[F5FP010]

pCC1FOS/pEpiFOS Forward End-Sequencing Primer

1 nmol

190073

[F5RP011]

pCC1FOS/pEpiFOS Reverse End-Sequencing Primer

1 nmol

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CopyControl™ HTP Fosmid Library Production Kit

Optimierte Version des bewährten CopyControl Fosmid Library Production Kits

Das CopyControl System ermöglicht die vollständige Kontrolle über die Erzeugung einer stabilen Fosmid-Genbank:

Sichern Sie die Stabilität der Klone durch single copy Klonierung
Induktion der Klone erhöht die Kopienzahl der Fosmide (für z.B. Plasmid-Isolierung)
Neuer pCC2FOS™ Vektor optimiert die Ergebnisse beim Sequenzieren der Insertenden (besonders für High Throughput Anwendungen)
Keine Notwendigkeit eines partiellen Restriktionsverdaus oder PFGE bei der Präparation der genomischen DNA
Hohe Kloniereffizienz (>106 Fosmide aus 100 ng DNA)

Optimierte Primer Bindungsstellen beim Vektor pCC2FOS

Inhalt des Kits:

CopyControl pCC2FOS™ Vektor
End-Repair Enzym Mix
End-Repair 10X Puffer
dNTP Mix
Fast-Link™ DNA Ligase
Fast-Link™ 10X Ligation Puffer
ATP Lösung
GELase™ Gel-Digesting Preparation
GELase™ 50X Reaktionspuffer
MaxPlax™ Lambda Packaging Extracts
Kontroll-DNA
Ligierte Lambda Kontroll-DNA
EPI300™ Plating Strain
Control Lambda Plating Strain
CopyControl™ Induction Solution

Bestellinformationen:

Art.-Nr.

[Epicentre
Cat.-No.]

Bezeichnung

Verpackung

191080

[CCFOS059]

CopyControl HTP Fosmid Library Production Kit

1 Kit

Individuelle Kitkomponenten:

Art.-Nr.

[Epicentre
Cat.-No.]

Bezeichnung

Verpackung

190310

[HTFP061]

pCC2 Forward Sequencing Primer

1 nmol

190315

[HTRP062]

pCC2 Reverse Sequencing Primer

1 nmol

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EpiFOS™ Fosmid Library Production Kit

Das Kit enthält alle benötigten Reagenzien um bis zu 10 vollständige Fosmid Genbänke herzustellen. Die mit dem Vektor pEpiFOS-5 konstruierten Cosmide können nicht zu „high-copy“ induziert werden.

Inhalt des Kits:

pEpiFOS-5 Fosmid Vektor
End-Repair Enzym Mix
End-Repair 10X Puffer
dNTP Mix
Fast-Link™ DNA Ligase
Fast-Link™ 10X Ligation Puffer
ATP Lösung
GELase™ Gel-Digesting Preparation
GELase™ 50X Reaktionspuffer
MaxPlax™ Lambda Packaging Extracts
Kontroll-DNA
Ligierte Lambda Kontroll-DNA
EC100-T1™ Plating Strain
Control Lambda Plating Strain

Bestellinformationen:

Art.-Nr.

[Epicentre Cat.-No.]

Verpackung

190070

[FOS0901]

1 Kit

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pWEB™ & pWEB-TNC™ Cosmid Cloning Kits

pWEB™ & pWEB-TNC™ Cosmid Cloning Kits

pWEB-TNC™ Deletion Cosmid Transposition Kit

Kits zur Klonierung genomischer DNA in den pWEB oder pWEB-TNC Cosmid Vektor. Cosmide, erzeugt mit dem pWEB-TNC Cosmid Vektor, können zur anschließenden Generierung zufälliger Deletionen (intramolekulare Transposition) mit dem pWEB-TNC Deletion Cosmid Transposition Kit behandelt werden.

Typische Anwendungen:

Erzeugung von Cosmid Bibliotheken für Mapping, Sequenzierung und andere Experimente

Inhalt des pWEB oder pWEB-TNC Cosmid Cloning Kits:

pWEB Cosmid Vector oder pWEB-TNCCosmid Vektor
End-Repair Enzym Mix
End-Repair 10X Puffer
dNTP Mix
Fast-Link™ DNA Ligase
Fast-Link™ 10X Ligation Puffer
ATP Lösung
GELase™ Gel-Digesting Preparation
GELase™ 50X Reaktionspuffer
MaxPlax™ Lambda Packaging Extracts
Cosmid Kontroll-DNA
Ligierte Lambda Kontroll-DNA
EC100™-T1R Plating Strain
Control Lambda Plating Strain

Bestellinformationen:

pWEB Cosmid Cloning Kit

Biozym Art.-Nr.

[Epicentre Cat.-No.]

Verpackung

133700

[PC8805]

1 Kit

pWEB-TNC Cosmid Cloning Kit

Biozym Art.-Nr.

[Epicentre Cat.-No.]

Verpackung

190030

[WEBC931]

1 Kit

Inhalt des pWEB-TNC Deletion Cosmid Transposition Kits:

EZ-Tn5 Transposase
EZ-Tn5 10X Reaktionspuffer
EZ-Tn5 10X Stop Solution
Ungelabelte Sequencing Primer
Kontroll-Cosmid mit 40 kb Insert
Steriles Wasser

Bestellinformationen:

pWEB-TNC Deletion Cosmid Transposition Kit

Art.-Nr.

[Epicentre Cat.-No.]

Verpackung

190035

[WEBC942]

10 Reaktionen

Individuelle Kitkomponenten:

pWEB-TNC Cosmid Vector

Art.-Nr.

[Epicentre Cat.-No.]

Verpackung

190031

[TNC9401]

10 µg

Sequenzierprimer für pWEB-TNC Cosmid Vector

Art.-Nr.

[Epicentre Cat.-No.]

Verpackung

190036

[TNC1SP01]

1 nmol

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