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Sequenzierung
Sequenzierung
SequiTherm™ EXCEL II
Das SequiTherm EXCEL II DNA Sequencing Kit kann sowohl zum manuellen „Cycle Sequencing“ als auch zur isothermalen Sequenzierung bei hohen Temperaturen eingesetzt werden. Die Markierung erfolgt durch gelabelte Primer oder durch internes Labeling (
32
P,
33
P oder
35
S).
Die Vorteile
Große Flexibilität – sowohl Cycle-Sequencing als auch isothermale Sequenzierung mit einem Kit
Auflösung schwieriger Regionen (Haarnadelstrukturen, hoher GC- oder AT-Gehalt, PCRProdukte, Direct Repeats, homopolymere Bereiche)
Sehr schnelles isothermales Protokoll
Leseweiten über 600 Basen mit den Long Read Terminationsmixen
Geringer Hintergrund
Typische Anwendungen
manuelles „Cycle Sequencing“ und isothermale Sequenzierung, besonders auch von schwierigen Templates
Inhalt des Kits
SequiTherm EXCEL II DNA Polymerase
SequiTherm EXCEL II Sequenzierpuffer
G, A, T, C Terminationsmixe
G, A, T, C Long Read Terminationsmixe
SequiTherm EXCEL II Prelabeling Mix
Kontrolltemplate
Kontrollprimer
Stopp/Ladepuffer
T4 Polynukleotidkinase
10X T4 Polynukleotidkinasepuffer
Wasser (steril, deionisiert)
Bestellinformationen:
Art.-Nr.
[Epicentre Cat.-No.]
Verpackung
104810
[SEM79100]
100 Reaktionen
Abb. A
Sequenzierung einer GC reichen Region:
600 fmol eines Plasmids mit einer (CGG)
23
Region wurden mit SequiTherm EXCEL II DNA Polymerase nach dem isothermalen Protokoll und mit internem
35
S Labeling sequenziert.
Abb. B
Cycle Sequencing mit SequiTherm EXCEL II DNA Polymerase:
100 fmol pUC19 DNA wurden nach dem Cycle Sequencing Protokoll mit [a-35S]-dATP sequenziert.
SequiTherm™ EXCEL II Kit für Sequenzierautomaten
Die SequiTherm EXCEL II DNA Sequencing Kits wurden für die folgende Automaten optimiert:
LI-COR
®
4000 und 4200 Sequenzierer
NEN
®
Global IR DNA Sequenzierer
ALF
TM
DNA Sequenzierer
ABI PRISM
®
DNA Sequenzierer (nur Dye Primer Technologie)
Für die Anwendung mit LI-COR
®
und NEN
®
Sequenzierautomaten stehen zwei verschiedene Kits zur Verfügung.
Für 25 - 41 cm Gele: Das Kit enthält Terminationsmixe, die Leseweiten bis zu 1000 Basen ermöglichen.
Für 66 cm Gele: Das Kit enthält Terminationsmixe, die die Signalintensität im Bereich von 1000-1400 Basen erhöht und so die längsten Leseweiten bei der Verwendung von 66 cm Gelen und der Base ImagIR
TM
Software (Version 4X) ermöglicht.
Die Vorteile
Große Flexibilität, „Cycle Sequencing“ und isothermale Sequenzierung möglich
Auflösung schwieriger Regionen (Haarnadelstrukturen, hoher GC- oder AT-Gehalt, PCRProdukte, Direct Repeats, homopolymere Bereiche)
Sehr schnelles isothermales Protokoll
Geringer Hintergrund
Enthält 7-deaza-dGTP (Reduzierung der Bandenkompression während der Gelelektrophorese)
Typische Anwendungen
„Cycle Sequencing“ oder isothermale Sequenzierung mit Sequenzierautomaten, besonders auch von Templates, die schwer zu sequenzierende Regionen enthalten, die mit anderen Kits nicht aufgelöst werden können.
Inhalt des Kits
SequiTherm EXCEL II DNA Polymerase
SequiTherm EXCEL II Sequenzierpuffer
G, A, T, C Terminationsmixe
Kontrolltemplate
Stopp/Ladepuffer
Wasser (steril, deionisiert)
Bestellinformationen:
Art.-Nr.
[Epicentre
Cat.-No.]
Bezeichnung
Verpackung
104814
[SE9202LC]
SequiTherm EXCEL II LC 66 cm, LI-COR, NEN
100 Reaktionen
104815
[SE9101LC]
SequiTherm EXCEL II LC 25-41 cm, LI-COR, NEN
100 Reaktionen
Art.-Nr.
[Epicentre Cat.-No.]
Bezeichnung
Verpackung
104618
[SF81015]
Stopp/Ladepuffer LI-COR, NEN (Fuchsinrot/Bromphenolblau)
1.5 ml
104619
[SA85025]
Stopp/Ladepuffer ALF, ABI, NEN (Fuchsinrot)
2.5 ml
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