Warum in vitro Translation?
Spart Zeit, vereinfachte Handhabung, sicher:
- Kein Klonieren – PCR Fragmente können als lineares Template verwendet werden
- Keine Transformation, Selektion, Zellkultur
- Kein Entstehen von genetisch modifizierten Organismen
Spezifisch:
- Nur das gewünschte Protein wird exprimiert
Flexibel:
- Offenes und modifizierbares System: Zugabe von Chaperonen und Co-Faktoren möglich
- Skalierbar von 50 µg bis 50 mg
- High-Throughput geeignet
Hochspezifisches und offenes Labeling:
- Radioaktiv-, Biotin- oder Fluoreszenz-gelabelte Proteine für Interaktions-, X-Ray oder NMR Analyse
Einfache Template Generierung:
- Optimierte Kits für verschiedene Applikationen / Proteine
RTS: Rapid Translation System
Skalierbare Zell-freie Protein Expression in verschiedenen Systemen
E. coli, Wheat Germ und Insect
Quick & Easy: Batch-Methode:
- Screening
- Optimierung
- Parallele Expression von Varianten
- Inkubationszeit 2-4 Stunden
Zellfreie Expressionssysteme enthalten:
- Alle Komponenten der Protein Expressionsmaschinerie
- Energie Regenerationssystem
- Kein Kern, Mitochondrien, mRNA, Cytoskelett
- Nur eine mRNA: Gen-spezifisches Template
High Yield - CECF-Methode: (Continuous Exchange Cell-free Technology)
- Antigen Produktion
- Labeling für NMR, X-Ray
- Funktionales Testung
- Inkubationszeit bis zu 24 Stunden für hohe Ausbeuten
Das System besteht aus zwei Kammern, die durch eine semipermeable Membran getrennt sind. So werden Substrate und Energie der Reaktion kontinuierlich zugeführt und inhibierende Nebenprodukte abgeführt. Daraus resultiert: Längere Reaktionszeit = Höhere Ausbeute
