Ligasen

Wichtige Tools in der Molekularbiologie

Ligasen sind Enzyme, die Reaktionen katalysieren, bei denen unter Energieverbrauch zwei Moleküle miteinander verbunden werden. Die Ligation von DNA bzw. RNA ist in vielen molekularbiologischen Anwendungen ein entscheidender Schritt, welcher mit Hilfe einer DNA- oder RNA-Ligase bewerkstelligt wird.

Einige Applikationsbeispiele:

  • Klonierung – Rapid Ligation mit blunt oder cohesive (sticky) ends
  • Library Prep für NGS – Adaptor Ligation
  • Ligase Chain Reaction – SNP Detektion
  • Ligation von Nicks
  • Zirkularisierung

Die folgende Tabelle gibt Ihnen einen detaillierten Überblick über die spezifischen Eigenschaften unserer bewährten Ligasen und erleichtert die Auswahl des richtigen Enzyms für Ihr erfolgreiches Experiment.

Enzyme Ligation
 Temp
Cofactor Ligation Template Required to Ligate Type of Ends Ligated Blunt/Cohesive Primary Application Heat Inactivation
T4 DNA Ligase Rapid (351100301, 351100302) 25°C ATP No Yes/Yes Rapid Ligation 10 min, 70°C
T4 DNA Ligase (Rapid)
 (280225)
25°C ATP No Yes/Yes Rapid Ligation  
T4 DNA Ligase
(280220)
4°C-25°C ATP No Yes/yes Cloning 15 min, 65°C
T3 DNA Ligase
 (280210)
20°C ATP No Yes/Yes Tolerates High Ionic Strength  
T7 DNA Ligase
 (280250)
25°C ATP No Yes/Yes 1000 fold higher activity on sticky ends than blunt ends  
E. coli DNA Ligase
 (280200)
5°C-25°C NAD Yes; DNA only Weak activity/yes Ligation of nicks in dsDNA, make long cDNA 20 min, 65°C
Ampligase  (111075, 110250, 111250, 113100,114100,112501) 45°-70°C NAD Yes; DNA only No/yes Ligation of adjacent 3´-hydroxylated and 5´-phosphorylated termini in duplex DNA structures, LCR, LDR, SNP detection No; half-life >1h, 95°C
Taq DNA Ligase
 (280260)
45°-65°C NAD Yes; DNA only No/yes Ligase Chain reaction No; half-life 30 min, 95°C
CircLigase ssDNA Ligase (131401, 131405) 60 °C ATP No N/A Circularizes ssDNA or ssRNA >30 bases long 10 min 80°C
CircLigase II ssDNA Ligase (131402, 131406) 60 °C None No N/A Circularizes ssRNA or ssDNA >15 bases long 10 min 80°C
T4 RNA Ligase truncated (280245) 37°C None No N/A Preadenylated 5′ ends of DNA or RNA are ligated to the 3′
 ends of RNA
 
T4 RNA Ligase 2 (280240) 37°C ATP No No Ligating dsRNA nicks and ssRNA to ssRNA  
T4 RNA Ligase 1
(280230)
37°C ATP No n/A Ligate ssRNA to ssRNA or ssDNA  
Wichtige Tools in der Molekularbiologie Ligasen sind Enzyme, die Reaktionen katalysieren, bei denen unter Energieverbrauch zwei Moleküle miteinander verbunden werden. Die Ligation von DNA... mehr erfahren »
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Ligasen

Wichtige Tools in der Molekularbiologie

Ligasen sind Enzyme, die Reaktionen katalysieren, bei denen unter Energieverbrauch zwei Moleküle miteinander verbunden werden. Die Ligation von DNA bzw. RNA ist in vielen molekularbiologischen Anwendungen ein entscheidender Schritt, welcher mit Hilfe einer DNA- oder RNA-Ligase bewerkstelligt wird.

Einige Applikationsbeispiele:

  • Klonierung – Rapid Ligation mit blunt oder cohesive (sticky) ends
  • Library Prep für NGS – Adaptor Ligation
  • Ligase Chain Reaction – SNP Detektion
  • Ligation von Nicks
  • Zirkularisierung

Die folgende Tabelle gibt Ihnen einen detaillierten Überblick über die spezifischen Eigenschaften unserer bewährten Ligasen und erleichtert die Auswahl des richtigen Enzyms für Ihr erfolgreiches Experiment.

Enzyme Ligation
 Temp
Cofactor Ligation Template Required to Ligate Type of Ends Ligated Blunt/Cohesive Primary Application Heat Inactivation
T4 DNA Ligase Rapid (351100301, 351100302) 25°C ATP No Yes/Yes Rapid Ligation 10 min, 70°C
T4 DNA Ligase (Rapid)
 (280225)
25°C ATP No Yes/Yes Rapid Ligation  
T4 DNA Ligase
(280220)
4°C-25°C ATP No Yes/yes Cloning 15 min, 65°C
T3 DNA Ligase
 (280210)
20°C ATP No Yes/Yes Tolerates High Ionic Strength  
T7 DNA Ligase
 (280250)
25°C ATP No Yes/Yes 1000 fold higher activity on sticky ends than blunt ends  
E. coli DNA Ligase
 (280200)
5°C-25°C NAD Yes; DNA only Weak activity/yes Ligation of nicks in dsDNA, make long cDNA 20 min, 65°C
Ampligase  (111075, 110250, 111250, 113100,114100,112501) 45°-70°C NAD Yes; DNA only No/yes Ligation of adjacent 3´-hydroxylated and 5´-phosphorylated termini in duplex DNA structures, LCR, LDR, SNP detection No; half-life >1h, 95°C
Taq DNA Ligase
 (280260)
45°-65°C NAD Yes; DNA only No/yes Ligase Chain reaction No; half-life 30 min, 95°C
CircLigase ssDNA Ligase (131401, 131405) 60 °C ATP No N/A Circularizes ssDNA or ssRNA >30 bases long 10 min 80°C
CircLigase II ssDNA Ligase (131402, 131406) 60 °C None No N/A Circularizes ssRNA or ssDNA >15 bases long 10 min 80°C
T4 RNA Ligase truncated (280245) 37°C None No N/A Preadenylated 5′ ends of DNA or RNA are ligated to the 3′
 ends of RNA
 
T4 RNA Ligase 2 (280240) 37°C ATP No No Ligating dsRNA nicks and ssRNA to ssRNA  
T4 RNA Ligase 1
(280230)
37°C ATP No n/A Ligate ssRNA to ssRNA or ssDNA  
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