Elektrophorese & Blotting

Elektrophorese: Ein biochemisches Trennverfahren

Bei der Elektrophorese handelt es sich um ein biochemisches Trennverfahren, bei dem die Wanderung von positiv und negativ geladenen Molekülen im elektrischen Feld ausgenutzt wird. Im elektrischen Feld wandern bewegliche, elektrisch geladene Teilchen jeweils zum entgegengesetzt geladenen Pol: Positiv geladene Teilchen (Kationen) wandern zum Minus-Pol (Kathode), negativ geladene Teilchen (Anionen) wandern zum Plus-Pol (Anode).

Besonders zwei Eigenschaften eines Moleküls bestimmen seine Wanderungsgeschwindigkeit: 

• Je kleiner das Teilchen, desto schneller ist die Wanderung
• Je größer die Ladung, desto schneller ist die Wanderung

Auf diese Weise werden Nukleinsäuren und Proteine einfach in der horizontalen und vertikalen Gelelektrophorese aufgetrennt und im anschließenden Blotting zuverlässig auf die jeweilige Membran übertragen.

Biozym bietet Ihnen mit den EasyPhor Systemen den Top-Standard für horizontale und vertikale Gelelektrophorese sowie fürs Blotting.

Das innovative Konzept unserer Elektrophorese-Geräte:

• Einfache Handhabung
• Durchdachtes modulares Design
• Hohe Fertigungsqualität
• Ausführliche individuelle Beratung
• Auf Wunsch kundenspezifische Zusammenstellung der Systeme ohne Aufpreis
• Riesiges Gelelektrophorese-Zubehör

Horizontale Gelelektrophorese

Die horizontale Agarose-Gelelektrophorese ist eine der am häufigsten durchgeführten biowissenschaftlichen Labortechniken zur Auftrennung von DNA- bzw. RNA-Molekülen nach ihrer jeweiligen Größe. Dies ist für eine Reihe von Forschungsanwendungen sehr nützlich, z. B. bei der Identifizierung unbekannter Proben im Vergleich zu bekannten Ergebnissen oder bei der Durchführung von Qualitätskontrollen.

In der folgenden Tabelle finden Sie die wichtigsten Daten der horizontalen Elektrophoresekammern aus unserem Lieferprogramm:

 
Gut zu wissen: Weiteres benötigtes Gelelektrophorese-Zubehör wie Agarosen, Marker, Ladepuffer und Farbstoffe bieten wir Ihnen ebenfalls gern an.

 Mit dem Lonza FlashGel System haben wir die „All-inclusive“ Lösung der horizontalen Gelelektrophorese für Sie – eine schnelle, sensitive, einfache Analyse, Probenrückgewinnung und Dokumentation von DNA- & RNA-Proben.

Vertikale Gelelektrophorese

Die vertikale Gelelektrophorese, auch als Protein- oder Polyacrylamid-Gelelektrophorese (PAGE) bekannt, ist eine universelle Technik, die in vielen Life-Science-Laboren verwendet wird. Das Ziel ist es, eine gemischte Proteinprobe zu trennen und einzelne Proteine aus dieser Mischung zu identifizieren und zu quantifizieren. Die Ausgangsprobe kann aus einer beliebigen Anzahl von Quellen stammen, wie z. B. einer Patientenprobe, homogenisiertem Gewebe oder einer Bakterienkultur. Es ist auch möglich, PAGE zur Auftrennung von DNA und RNA zu verwenden, aber Proteine sind der häufigste Probentyp.

So funktioniert die vertikale Gelelektrophorese:

Es gibt mehrere Arten von PAGE-Techniken, die verwendet werden, aber die gebräuchlichste heißt SDS-PAGE. Bei der SDS-PAGE wird das Detergens Natriumdodecylsulfat verwendet, um die Proteine zu denaturieren und ihr Masse-Ladungs-Verhältnis zu normalisieren. Ohne SDS würden sowohl das Molekulargewicht als auch die Ladung des Proteins seine Auftrennung im Gel beeinflussen. Bei SDS beeinflusst nur das Molekulargewicht die Migrationsgeschwindigkeit und so trennen sich die Proben entsprechend. PAGE ohne SDS wird als native PAGE bezeichnet, da die Proteine in ihrer nativen Konformation bleiben.

In der folgenden Tabelle finden Sie die wichtigsten Daten der verfügbaren Kammer-Modelle der Biozym EasyPhor PAGE Reihe:

Blotting

Die Polyacrylamid-Gelelektrophorese (PAGE) wird oft mit dem Western Blotting kombiniert. Die im Blotting verwendeten Antikörper binden an spezifische Proteinantigene und ermöglichen es einzelne Proteine mit hoher Spezifität zu identifizieren.

 Aus unserer EasyPhor Reihe bieten wir Ihnen hier Wet-Blotter und Semi-Dry Elektroblotter in verschiedenen Formaten an:

• EasyPhor PAGE WetBlotter: Flexible, modular aufgebaute Systeme für effizienten Transfer von Proteinen im Mini oder Maxi Format.
• EasyPhor Semi Dry Blotter: Elektroblotter für hocheffizienten Transfer von Nukleinsäuren oder Proteinen aus Polyacrylamid oder Agarosegelen auf Nitrocellulose oder Nylonmembranen

Gut zu wissen: Weiteres benötigtes Zubehör rund ums Western Blotting finden Sie ebenfalls in unserem umfangreichen Portfolio:

• Nitrocellulose- und PVDF-Membranen, Transfer-Puffer, Wasch- und Blocking-Lösungen für den Transfer im Blotter
• Vorgefärbte Marker - machen den Transfer auf die Membran sichtbar
• Ponceau- oder Fluoreszenz-Färbung, Chemilumineszenz-Substrate, Fluoreszenzmarkierte Zweit-Antikörper für die Western Blot Detektion

FAQs – Häufig gestellte Fragen zu Elektrophorese & Blotting

Wie sind EasyPhor Elektrophoresekammern zu reinigen?

Zur Reinigung der Elektrophoresekammern warmes Wasser (nicht über 60°C) und ein mildes Detergenz verwenden. Den Elektrophorese-Tank nach Gebrauch mit destilliertem Wasser spülen, um Salzablagerungen zu vermeiden.
Achtung: Bitte verwenden Sie kein Aceton, Phenol, Chloroform, Carbontetrachloride, Methanol, Etahnol oder Isopropanol. 
RNase Dekontamination: System wie oben beschrieben reinigen, anschließend mit 3% Wasserstoffperoxid (H2O2) für 10 Minuten waschen. Danach mit 0,1% DEPC behandeltem, destilliertem Wasser spülen. RNaseZAP (Ambion) kann ebenfalls verwendet werden (Anleitung für Kunststoff Gelelektrophorese Tanks verwenden).

Passen die Glasplatten des EasyPhor-PAGE-Systems auch für vertikale Elektrophorese-Systeme/Gießstände anderer Hersteller?

Das übliche Format von Glasplatten für PAGE-Elektrophorese ist 10x10 cm, die EasyPhor-Glasplatten passen folglich auch in die meisten Systeme anderer Hersteller/Anbieter. 
Ausnahme der Hersteller verwendet Glasplatten mit einem Format von z.B. 9x10 cm (Bio-Rad)

Kann ich Ersatzteile wir Platindraht, Elektrodenkassetten, Gelschlitten auch einzeln nachkaufen?

Ja, das ist kein Problem. Sie können Gelelektrophorese-Zubehör auch einzeln bei Biozym erwerben. Falls Sie das gesuchte Produkt nicht sofort im Webshop finden, nehmen Sie gerne Kontakt zu uns auf.

Ich benötige für meine Gelkammer andere Kämme als in den Standardsystemen angegeben. Kann man die bei der Bestellung austauschen?

Ja, das ist kein Problem. Wir können die Standardkämme ohne Mehrkosten gegen andere Kämme austauschen. Bitte kontaktieren Sie dazu über das Kontaktformular oder die Support-Adresse.

Kann ich die Gelkammern auch an eine Bio-Rad Spannungsversorgung anschließen?

Ja, das ist kein Problem. Wir haben für fast alle Spannungsgeber Adapter, die wir Ihnen gern bei der Bestellung mitliefern. Bitte kontaktieren Sie dazu über das Kontaktformular oder die Support-Adresse.