Das INCOGNITO™ SP6 psi-RNA Transcription Kit ist für die Synthese von Pseudouridin-haltiger RNA (psi-RNA) aus einer In-vitro-Transkriptionsreaktion (IVT) optimiert. Obwohl die Ausbeute je nach DNA-Template und anderen Faktoren variiert, liefert eine standardmäßige zweistündige 20-µl-Reaktion dank der hohen Leistungsfähigkeit des SP6-Scribe™-Enzyms bis zu 60 µg RNA aus 1 µg Kontroll-Template. Die Standardreaktion kann hochskaliert werden, um Milligramm Mengen an RNA zu produzieren, die die kanonischen Nukleotide ATP, CTP, GTP und das modifizierte Nukleotid Pseudouridin-5'-triphosphat (psi-TP) enthalten.

Modifizierte psi-mRNAs führen im Vergleich zu unmodifizierten mRNAs zu höheren Proteinkonzentrationen und geringeren angeborenen Immunreaktionen in menschlichen und anderen Säugetierzellen, die verschiedene RNA-Sensoren exprimieren.

INCOGNITO™ SP6 IVT psi-RNA kann durch Verwendung des ScriptCap™ Cap 1 Capping-Systems von CELLSCRIPT™ (enthält sowohl ScriptCap™ Capping-Enzym als auch 2'-O-Methyltransferase) und A-Plus™ Poly (A) Polymerase Tailing Kit (separat erhältlich) zu mRNA mit geringer Immunogenität weiterverarbeitet werden.

Um die Immunogenität maximal zu reduzieren, kombinieren Sie INCOGNITO™ psi-mRNA mit dem Min-Immune™ Gold dsRNA Removal Kit, um nahezu dsRNA-freie mRNA mit extrem geringer Immunogenität herzustellen, die für nachgeschaltete Anwendungen wie Zell- und Gentherapieforschung und die Entwicklung von mRNA-Impfstoffen geeignet ist.

Die Vorteile zusammengefasst:

• Geringere Immunogenität: Synthetisierte Transkripte enthalten psiTP für eine reduzierte Immunantwort.
• Kompatibel mit SP6-Polymerase: Mit SP6-RNA-Polymerase lassen sich bis zu 60 µg psi-RNA gewinnen.
• Skalierbar: Die Standardreaktion kann hochskaliert werden, um Milligramm-Mengen an psi-RNA herzustellen.

Das Produkt ist nur für Forschungszwecke bestimmt (RUO).

Nutzungs- und Labellizenzen für bestimmte Produkte: Der Käufer erhält ein beschränktes, nicht exklusives, nicht übertragbares Recht, die von CELLSCRIPT™ gekauften Produkte ausschließlich für eigene interne Forschungszwecke im Labor zu nutzen. Weitere Informationen finden Sie unter Label License: https://www.cellscript.com/terms-conditions/

Mitgelieferte Materialien:

Wichtig Bei -20 °C in einem Gefrierschrank ohne Abtaufunktion lagern. Nicht bei -70 °C lagern.

SP6-Kontroll-Template-DNA: Ist ein linearisiertes 4,1-kb-Plasmid, das einen SP6-Promotor gefolgt von einem 1,4-kb-Lambda-DNA-Insert enthält, was zu einem 1.386 Basen langen Runoff-Transkript führt. Die Kontroll-Template-DNA wird in einer Konzentration von 0,5 µg/µl in T10E1-Puffer (10 mM Tris-HCl, pH 7,5, 1 mM EDTA) bereitgestellt.

Erforderliche, aber nicht mitgelieferte Materialien

• Eine DNA-Matrize für die Transkription Ihrer RNA von Interesse.
• Materialien oder Kits zur Reinigung des in-Vitro transkribierten RNA.
• RNase-freier TE-Puffer (10 mM Tris-HCl, pH 7,5, 1 mM EDTA).