Nanodiscs
Nanodiscs bieten eine spannende Alternative zur Stabilisierung von Membranproteinen. Cube Biotech bietet alles, was Sie für den Einstieg in diese neuartige Technologie benötigen. Es gibt zwei Möglichkeiten, Membranproteine in Nanodics zu rekonstituieren:
Für die Rekonstitution von Membranproteinen, die bereits isoliert und mit Detergenzien solubilisiert worden sind, empfehlen wir die Verwendung von „Membrane Scaffold Proteins“ (MSPs) in Kombination mit Phospholipiden. Es steht eine Vielzahl von MSPs zur Verfügung, die zu Nanodics unterschiedlicher Größe zusammengesetzt werden können, um Proteine mit unterschiedlicher Anzahl von Transmembrandomänen aufzunehmen. His-getaggte MSPs ermöglichen eine einfache Erkennung der Nanodisc und sogar die Immobilisierung auf SPR-Chips (Surface Plasmon Resonance). Auf der anderen Seite, wenn das Protein von Interesse selbst ein His-Tag trägt, empfehlen wir, nicht markierte MSP-Proteine zu verwenden.
Für den Einsatz in zellfreien Expressionsreaktionen werden leere Nanodics empfohlen. Sie können mit unseren Nanodisc-Bausätzen zusammengebaut oder gebrauchsfertig erworben werden. Beachten Sie, dass diese Kits nur geringe Mengen an Nanodisc liefern, die für die zellfreie Expression geeignet sind und nicht für die direkte Rekonstitution bereits gereinigter Proteine empfohlen werden können.
Verschiedene Nanodisc-Features im Detail
Es gibt mehrere verschiedene Komponenten, aus denen eine Nanodisc hergestellt wird. Jede Komponente spielt eine bestimmte Rolle für die Funktionalität der MSP-Nanodisc. Die folgende Abbildung gibt einen Überblick über alle möglichen Zusammensetzungen und Modifikationen von MSP- Nanodics, die wir anbieten. Zusätzlich zu den in Abbildung 1 aufgeführten Merkmalen bieten wir hier auch DIBMA-basierte synthetische Nanodiscs an.