Überblick:   Das ExactSTART™ End-Tagged Double-Strand cDNA Synthesis Kit wandelt selektiv Small RNA mit             5´-Monophosphat- und 3´-Hydroxyl-Enden    (5’   pN--------------OH  3’)                                                            und (optional)             5´-Triphosphat- und 3´-Hydroxyl-Enden   (5’   pppN------------OH  3’)   nach einem spezifischen „Tagging“, in doppelsträngige cDNA um, die dann in einer PCR-Reaktion amplifiziert werden kann (siehe Abbildung). Zu diesen Small RNAs gehören miRNA, andere small non-coding (nc)RNAs und kleine Primär-Transkripte.   Anwendungen:   Herstellung von dsDNA aus Small RNA Als Template zum High Throughput (Next-Gen) Sequencing Als PCR-Template Als Target für Small RNA-Microarrays Zur Klonierung   Vorteile:   Schneller und einfacher Anreicherungsschritt für kleine RNAs- ohne Säulen oder Gelelektrophoreseschritt Starker Selektionsprozess führt zu Libraries mit einem hohen Anteil dsDNA von kleinen (<200 Basen) RNAs mit 5’ Monophosphat- oder 5’ Triphosphat-Enden One Day Protokoll   Art.-Nr Epicentre Art.-Nr. Bezeichnung Verpackung 191630 ES81010 ExactSTART End-Tagged ds cDNA Synthesis Kit for Small RNA 10 Reaktionen     Inhalt: RNA 5´ Polyphosphatase mit Puffer, Poly(A) Polymerase mit Puffer, Glykogen, ScriptGuard™ RNase Inhibitor, ATP, T4 RNA Ligase mit Puffer, Small RNA Acceptor Oligo, RNase Lösung, MMLV-RT mit Puffer, Small RNA cDNA Synthesis Primer (mit Tagging Sequence), Small RNA PCR Primer 1, Small RNA PCR Primer 2, FailSafe™ 2X PreMix E, Small RNA Enrichment Lösung, Nuclease-Freies Wasser, DTT, Control RNA Template.