HighPrep HMW DNA Kit

Das HighPrep High Molecular Weight DNA Kit wurde speziell zur Isolierung von hochmolekularer DNA (HMW-DNA) im Größenbereich von 50–300+ kb entwickelt. Das Kit extrahiert HMW-DNA aus biologischen Proben wie Vollblut, Knochenmark, Speichel, Wangenzellen, kultivierten Zellen, Geweben und Bakterien. Das HighPrep High Molecular Weight DNA Kit verwendet eine magnetische Bead-basierte Technologie in Kombination mit chaotropen Salzen, um HMW-DNA sanft zu isolieren und Inhibitoren zu entfernen. Die mit diesem Kit gereinigte HMW-DNA eignet sich besonders für die Analyse auf genomischen Long-Read-Sequenzierungsplattformen, einschließlich PacBio RSII/Sequel/Sequel II und Oxford Nanopore. 
DNA, die mit dem HighPrep High Molecular Weight DNA Kit gereinigt wurde, ist von guter Qualität und Reinheit. Das Kit enthält RNase A für die Entfernung von RNA. Die genaue Größe der extrahierten DNA hängt von der Probenmatrix, der Qualität des Ausgangsmaterials und den Verarbeitungsbedingungen ab.

Applikationen:
Die HMW-DNA-Isolierung eignet sich für molekulare Anwendungen wie:
•    Long-Read-Sequenzierung
•    NGS
•    Microarray
•    PCR-Amplifikation und Genotypisierung
•    Klonen
•    Restriktionsenzym-Verdau

Vorteile:
•    Isolierung von hochwertiger, hochmolekularer DNA 50-300+ kb
•    HMW-DNA eignet sich für alle Sequenzierungsplattformen der dritten Generation, einschließlich Nanopore und PacBio SMRT-Sequenzierung
•    Hohe DNA-Ausbeute aus einer Vielzahl von Ausgangsmaterialien
•    Effizientes Scale-up und Flexibilität
•    Offen für Automatisierung und einfach zu verwendende Protokolle (Kingfisher-Skripte™ sind erhältlich)
•    RNase zur Entfernung der RNA

Kurzer Überblick über das Protokoll. Ein detailliertes finden Sie unter Downloads    

1. Vorverarbeitung (je nach Probentyp optional): Homogenisierung von festem Gewebe, Zentrifugation oder Pelletierung von Zellen aus dem Wachstumsmedium.
2. Lyse: Zelllyse, Freisetzung von DNA und RNA in die Lösung. Die Zelllyse wird mit HAS Puffer, HTS Puffer und Pro K durchgeführt. RNase A baut die RNA in der Probe ab.
3. DNA-Bindung: MAG-HM1 Partikel binden in Gegenwart von 100% Ethanol und einem chaotropen Salz die DNA in der Lösung.
4. Bead-Waschen: Waschen der MAG-HM1 Partikel mit HMW1 Waschpuffer und HMW2 Waschpuffer.
5. DNA-Elution: Durch Zugabe eines niedermolaren Puffers mit basischem pH-Wert wird die DNA von den Beads in den Elutionspuffer freigesetzt.