INCOGNITO™ T7 5mC- & psi-RNA Transcription Kit
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INCOGNITO™ T7 5mC- & psi-RNA Transcription Kit
Das INCOGNITO™ T7 5mC- & psi-RNA Transcription Kit ist für die Synthese von 5-Methylcytidin- und Pseudouridin-haltiger RNA (5mC?-RNA) aus einer In-vitro-Transkriptionsreaktion (IVT) optimiert. Obwohl die Ausbeute je nach DNA-Template und anderen Faktoren variiert, liefert eine standardmäßige zweistündige 20-µl-Reaktion dank der hohen Leistungsfähigkeit des T7-Scribe™-Enzyms bis zu 100 µg RNA aus 1 µg Kontroll-Template. Die Standardreaktion kann hochskaliert werden, um Milligramm-Mengen an RNA zu produzieren, die die kanonischen Nukleotide ATP und GTP sowie die modifizierten Nukleotide Pseudouridin-5'-triphosphat (?TP) und 5-Methylcytidin-5'-triphosphat (5mCTP) enthalten.
Was ist der Vorteil der Verwendung von modifizierten Nukleotiden bei der RNA Synthese?
Modifizierte 5mCpsi-mRNAs führen im Vergleich zu unmodifizierten mRNAs zu höheren Proteinkonzentrationen und geringeren angeborenen Immunreaktionen in menschlichen und anderen Säugetierzellen, die verschiedene RNA-Sensoren exprimieren.
INCOGNITO™ T7 IVT 5mCpsi-RNA kann durch Verwendung des ScriptCap™ Cap 1 Capping-Systems von CELLSCRIPT™ (enthält sowohl ScriptCap™ Capping-Enzym als auch 2'-O-Methyltransferase) und A-Plus™ Poly (A) Polymerase Tailing Kit (separat erhältlich) zu mRNA mit geringer Immunogenität weiterverarbeitet werden.
Um die Immunogenität maximal zu reduzieren, kombinieren Sie INCOGNITO™ T7 IVT 5mCpsi-RNA mit dem Min-Immune™ Gold dsRNA Removal Kit, um nahezu dsRNA-freie mRNA mit extrem geringer Immunogenität herzustellen, die für nachgeschaltete Anwendungen wie Zell- und Gentherapieforschung und die Entwicklung von mRNA-Impfstoffen geeignet ist.
Die Vorteile zusammengefasst:
- Optimiertes Protokoll: Erträgt bis zu 100 µg 5mCpsi-RNA aus 1 µg DNA-Template.
- Geringere Immunogenität: Synthetisierte Transkripte enthalten 5mCTP und psiTP für eine reduzierte Immunantwort.
- Skalierbar: Die Standardreaktion kann hochskaliert werden, um Milligramm-Mengen an 5mCpsi-RNA zu produzieren.
Das Produkt ist nur für Forschungszwecke bestimmt (RUO).
Nutzungs- und Labellizenzen für bestimmte Produkte: Der Käufer erhält ein beschränktes, nicht exklusives, nicht übertragbares Recht, die von CELLSCRIPT™ gekauften Produkte ausschließlich für eigene interne Forschungszwecke im Labor zu nutzen. Weitere Informationen finden Sie unter Label License: www.cellscript.com/terms-conditions/
Mitgelieferte Materialien:
Wichtig Bei -20 °C in einem Gefrierschrank ohne Abtaufunktion lagern. Nicht bei -70 °C lagern.
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INCOGNITO™ T7 5mC- & ?-RNA Transcription Kit Contents (10 reactions) | |
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Kit Component |
Reagent Volume |
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T7-Scribe™ Enzyme Solution |
20 µl |
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10X T7-Scribe™ Transcription Buffer |
20 µl |
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GApsi5mC PreMix |
60 µl |
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(25 mM each GTP, ATP, psiTP & 5mCTP) | |
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100 mM Dithiothreitol (DTT) |
20 µl |
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RNase-Free DNase I, 1 U/µl |
10 µl |
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ScriptGuard™ RNase Inhibitor, 40 U/µl |
10 µl |
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T7 Control Template DNA, 0.5 µg/µl |
10 µl |
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RNase-Free Water |
1.4 ml |
T7-Kontroll-Template-DNA: Ist ein linearisiertes 4,1-kb-Plasmid, das einen T7-Promotor gefolgt von einem Phagen-Lambda-dsDNA-Insert enthält, das ein 1.375 Basen langes Runoff-Transkript kodiert. Die Kontroll-Template-DNA wird in einer Konzentration von 0,5 µg/µl in T10E1-Puffer (10 mM Tris-HCl, pH 7,5, 1 mM EDTA) geliefert.
Erforderliche, aber nicht mitgelieferte Materialien
- Eine DNA-Matrize für die Transkription Ihrer RNA von Interesse.
- Materialien oder Kits zur Reinigung des RNA-Produkts.
- RNase-freier TE-Puffer (10 mM Tris-HCl, pH 7,5, 1 mM EDTA).
| Produkttyp: | IVT Kit, modifizierte Nukleotide |
|---|---|
| Verpackung: | 10 Reaktionen |
